真菌的培育办法

1、钢环法

（1）资料：白假丝酵母菌、沙保弱培育基、无菌玻片、盖玻片、钢环（带有缺 口）、白腊。

（2）办法

①用无菌镊子取无菌小培育钢环，环的双面分别蘸取熔化的固体白腊，平置于无菌载玻片上，另取一无菌盖玻片，在酒精灯火焰上加热后掩盖于钢环上，待冷后，小培育钢圈即被固定于载玻片与盖玻片之间。

②用毛细滴管吸取消融的培育基，从钢环上端孔写入，写入量占容积的1/2即可。

③培育基冷却凝固后，用接种针挑取资料，由上端孔接种于环内培育基上。

④置湿盒内，室温或37℃下培育2—3d后，逐日调查，镜下可接连看到真菌成长进程及菌丝、孢子等特征，通常7d摆布即可长好。

⑤也可不必小培育钢环，直接将消融的培育基滴于无菌玻片上，待冷凝后从周边接种资料，用盖玻片掩盖后培育，在显微镜下接连调查成长状况。

（3）成果：镜下调查可见到有胞壁增厚的厚膜孢子及假菌丝。

2、小块琼脂玻片培育法

用无菌操作法将制好的待用琼脂平板用无菌接种针或接种环切成大约1cm2的方块，将其放置于灭菌的载玻片上。将标本或待检菌接种于琼脂块附近边际靠上方部位，然后用无菌镊子取一无菌的盖玻片盖在琼脂上。在无菌平皿内放入少数无菌水和一个无菌U形（或V形）玻璃棒。将此载玻片置于玻璃棒上，盖上平皿盖培育。每日用肉眼和显微镜调查孢子和菌丝的特色。