美国伯乐CFX96荧光定量PCR中文操作手册

CFX96 实时荧光定量PCR仪器的操作流程及注意事项

1、开始运行仪器

1.1打开电脑

1.2打开定量PCR仪底座开关

1.3启动CFX Manager软件

2、放置样品

2.1将PCR反应体系加入到0.2ml底缘八联管，盖上管盖；或加入底缘96孔板，用光学级封膜封好。

注意，必须戴一次性塑料手套，不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。

3、设置程序，运行试验

3.1定量PCR软件操作基本步骤为：

a.设置热循环程序文件

（protocol tab）

b.设置反应板文件（plate tab）。

c.点击"start run"键，运行程序。

3.2热循环程序文件（protocol tab）设置指南：点击edit（编辑）或create new（创建新程序）

3.3反应板设置文件（plate tab）设置指南：选择本次试验所需要使用的荧光染料种类；单机样品类型；如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品（standard），点击‘dilution series’键可设置其标准品浓度及稀释倍数。

3.4点击‘start run’键。单击open lid（打开热盖）或close lid（关闭热盖）放置样品；单击start run，保存文件，开始运行程序。

4、结果分析

4.1PCR反应结束后，软件会自动计算标准曲线和CT值等。

4.2如需进行表达量分析、等位基因分析等，在软件窗口选择相应分析功能。

4.3点击右上方的“Report”键，还可输出结果报告单。

5、关闭运行仪器

5.1实验结束后取出反应管，顺序关闭CFX Manager软件、定量PCR仪电源，关闭电脑。

注意！CFX仪器上盖部分为全自动控制，在通电状态，严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为，此类行为会导致上盖故障，危及仪器使用

原创作者：北京龙跃生物科技发展有限公司