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考马斯亮蓝法测蛋白质含量的优点
点击次数:565 发布时间:2015/11/2 14:49:01
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黄*
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考马斯亮蓝法测蛋白质含量的优点是:
(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。
(2)测定快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20分钟之间,颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。
(3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K、Na、Mg2离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。
考马斯亮蓝法测蛋白质含量的缺点是:
(1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。
(2)仍有一些物质干扰此法的测定,主要的干扰物质有:去污剂、TritonX-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH。(如同0.1N的酸干扰Lowary法一样)。
(3)标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用Beer定律进行计算,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。
300mgCyclopentolate Hydrochloride特价供应:盐酸环喷托酯标准品规格:5870-29-1
25mg特价供应:环磷酰胺相关物质A标准品规格:821-48-7
25mg特价供应:环磷酰胺相关物质B标准品规格:158401-52-6
25mg特价供应:环磷酰胺相关物质C标准品规格:1071-28-9
25mg特价供应:环磷酰胺相关物质D标准品规格:158401-51-5
50mg特价供应:2-环丙甲基氨基-5-氯二苯甲酮标准品规格:
蛋白250mgCycloserine特价供应:环丝氨酸标准品规格:68-41-7
50mgCyclosporine特价供应:环孢菌素标准品规格:59865-13-3
25mg特价供应:环孢菌素分离度用混合物标准品规格:
200mgCyclothiazide (AS)特价供应:莰烯氯噻嗪标准品规格:2259-96-3
500mgCyproheptadine Hydrochloride特价供应:盐酸赛庚啶标准品规格:41354-29-4
(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。
(2)测定快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20分钟之间,颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。
(3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K、Na、Mg2离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。
考马斯亮蓝法测蛋白质含量的缺点是:
(1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。
(2)仍有一些物质干扰此法的测定,主要的干扰物质有:去污剂、TritonX-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH。(如同0.1N的酸干扰Lowary法一样)。
(3)标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用Beer定律进行计算,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。
300mgCyclopentolate Hydrochloride特价供应:盐酸环喷托酯标准品规格:5870-29-1
25mg特价供应:环磷酰胺相关物质A标准品规格:821-48-7
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蛋白250mgCycloserine特价供应:环丝氨酸标准品规格:68-41-7
50mgCyclosporine特价供应:环孢菌素标准品规格:59865-13-3
25mg特价供应:环孢菌素分离度用混合物标准品规格:
200mgCyclothiazide (AS)特价供应:莰烯氯噻嗪标准品规格:2259-96-3
500mgCyproheptadine Hydrochloride特价供应:盐酸赛庚啶标准品规格:41354-29-4
原创作者:上海研生实业有限公司



