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噬菌体计数、免疫组化和免疫荧光结合的特异性

点击次数:189 发布时间:2015/6/26 8:41:42
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在筛选和测序后,下一步是将单克隆的结合性用以下三种形式显示出来:首先,得自靶标器官的、相对于无插入序列的噬菌体及其他器官和组织而数量增加的噬菌体;其次,在器官或组织的脉管系统上进行免疫组化和免疫荧光染色时的阳性染色;第三,我们合成、注射以及分析荧光标记的同源多肽的生物分布,以此来建立多肽在噬菌体环境之外的活性。elisa试剂盒

结合的特异性

在用噬菌体计数、免疫组化和免疫荧光进行观测时,那些合成的同源多肽可能减少或消除对靶标的结合,我们通过这一点的显示确定特异性。一般将一个结合性或定位性的多肽转入单价的T7 Selecg—1载体或使用单独的T7 Select415-1克隆,并从lmg/m1的多肽溶液开始(大约lmmol/L)绘制抑制曲线,然后以半对数增量(half-1og increment)+0.01tumol/L逐步增加。如果使用的是单价展示多肽,那么从抑制曲线测定的IC50就是多肽的表观Kd值。ELISA试剂盒

原创作者:上海研生实业有限公司

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