RNA试剂盒的操作步骤

用于各种植物、动物、微生物的RNA提取，在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂，非常方便，适合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、纯度高，可用于分子生物学后实验。

RNA试剂盒操作步骤：

1. 样品处理

a. 植物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混匀。

b. 动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。

c. 贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。

d. 细胞悬液：离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。

e. 血液处理：取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟， 10000rpm离心1分钟。弃上清，若沉淀含有红细胞，可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。

2. 将处理后的样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白复合物完全分离。

3. 向匀浆样品中加0.2ml，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置3-5分钟。

4. 2-8℃ 12000rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中，把水相转移到新管中，不要吸到沉淀。

5. 吸附柱前处理：在吸附柱中加入500ul 洗柱液，室温放置2分钟，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。

6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀，加入吸附柱静置2分钟，2-8 12000rpm ℃ 离心2min，弃废液。

7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。

8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。

9. 12000rpm离心2min，弃掉收集管，将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。

10. 将吸附柱放入新管中，向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O，室温放置5min，12000rpm室温离心2min

即得到RNA。

原创作者：江苏晶美生物科技有限公司