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大鼠分泌型免疫球蛋白ELISA试剂盒操作方法

点击次数:221 发布时间:2015/2/12 8:24:00
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大鼠分泌型免疫球蛋白elisa试剂盒试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量。现在我们看下操作方法是如何执行的?
操作步骤:仪器仪表技术交流,信,!3 W& ?( P( a, l w+ b
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2
、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3
、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
4
、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
5、温育:操作同3。
6、洗涤:操作同5。
7、中显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。+ |& Q0 }; e4 |3 S+ m5 F% P2 t
9、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

原创作者:江苏晶美生物科技有限公司

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