研究提供新型乙肝治疗策略

研究人员在一项研究中，在HBV基因组的S和X区中确定了交叉基因型保守的HBV序列，可被Cas9切口酶靶定进行特异性和有效的切割。这种方法不仅能破坏记者细胞系中的游离cccDNA和染色体整合HBV靶位点，而且也能破坏慢性感染和新感染肝癌细胞株中的HBV复制。这些数据表明，可以使用CRISPR/Cas9切口酶，作为HBV感染的新型治疗策略。

最近，Cas9酶的一种突变“切口酶”版本已经得以描述，它能够基于一段共表达的引导RNA界定的靶序列，在特异位点引入单链DNA断裂。因此，通过Cas9切口酶和一对适当间距的gRNAs、两个相邻、相反的链缺口，可引起DSBs，并触发易出错的非同源末端连接修复。重要的是，利用完整的链作为模板，不希望得到的脱靶缺口得到了修复。为此，双切口方法可使靶向特异性提高1500倍。酶保真度的这一显著提高，未来可用于Cas9核酸酶的治疗应用，如用于慢性HBV感染的治疗。

在这项研究中，研究人员调查了改进的CRISPR/Cas9切口酶系统，可选择性地靶定和灭活记者细胞系和慢性感染的肝癌细胞株中的游离以及染色体整合的HBV序列。研究人员证明，HBV的S和X基因的两个高度保守区域，可以用于Cas9n介导的HBV灭活，从而支持一个概念：设计酶的进一步临床开发，最终可能根除感染患者体内的HBV。