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提取血清的一般步骤

点击次数：1472 发布时间：2015/3/26 8:52:56

商家名片

邵**

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血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。

提取血清的一般步骤如下：

1. TRIzol LS（Invitrogen）：血清=体积比3:1，涡旋混匀，冰中静止10min，（TRIzol LS的体积定义为V）。

2.加入4/15V体积的，涡旋混匀30s，置于冰中，10min。

3.离心，14000rpm，15分钟，4°。

4.轻轻取出离心管，吸取上清，移入新的离心管，避免白色中间层吸入。

5.异丙醇，实验开始时，-20°冻存，取出，加入2/3V异丙醇，轻轻混匀，-20°，静止15min。

6.取出离心，14000rpm，10分钟，4°。

7.轻轻倾倒，去液体。（原理上，本步骤应见沉淀，但本人从未见到沉淀）。

8.加入4/3V的75%的乙醇，混匀，离心。8000rpm，5min，4°。

9.取出，去液体，置于空气中5min中。

10.加入20ul的DEPC水稀释。

11.Nanoｄrop 测浓度。

原创作者：江苏宝莱生物科技有限公司