Elisa试剂盒实验中样品的处理方法

一、 血清

血清是最常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。

用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。（最好将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃ 1000×g离心20分钟，仔细收集上清。建议将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。同时必须得注意，在采血的过程中应避免溶血，以及避免细菌污染，以免造成实验结果的不准确。

二、 血浆

用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

三、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

四、 细胞裂解液

1. 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2. 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3. 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

4. 将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温解冻样品，反复冻融几次，使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎，以达到裂解的目的。

5. 4℃ 10000×g 离心10min，除去细胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

五、组织匀浆液

1. 将组织样本用PBS (0.01M, PH 7.4) 冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。

2. 将组织块称重，记录后剪碎，碎块应尽量小，便于匀浆得更充分

3. 将组织按一定的比例加入预冷的PBS（临用前加入蛋白酶抑制剂）匀浆，匀浆比例为组织重量：PBS体积=1:9，匀浆时置于冰上或冰浴中。

4. 吸取匀浆液到离心管，4℃ 5000×g 离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

六、 尿液、唾液等其他液体生物样本

1000×g离心20min，取上清即可检测。

为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本最好在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。

原创作者：江苏宝莱生物科技有限公司