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elisa试剂盒包被的注意事项

点击次数:737 发布时间:2015/2/9 8:30:17
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elisa试剂盒的操作步骤有包被、加样、加酶标抗体等步骤,而包被这一过程应注意的事项有:包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。

通常在elisa板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置一个晚上,37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果。包被的最适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。

抗原的包被要根据具体情况而定,比如有的抗原,只要加入抗原包被液后,放置一个晚上就可以。刚开始做一种抗原或抗体的elisa时最好先做几个梯度,以确定最适合的浓度。

包被这一步骤很重要,它会影响着实验的效果。

原创作者:江苏晶美生物科技有限公司

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