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技术文章
细胞复苏的操作步骤
点击次数：253 发布时间：2015/1/22 8:27:15
商家名片
邢*
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在实际操作中，冻存的细胞要进行复苏，复苏之后再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。进行细胞复苏的操作步骤如下：
（1）佩戴眼镜和手套，从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。
（2）迅速放入38℃水浴中，并不时摇动，在1分钟内使其完全融化，然后在无菌下取出细胞。
（3）在1000r/min速度下离心5～10分钟，弃去上层液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，接种浓度1×109/L，置37℃温箱静置培养，次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中，并加入培养基贴壁培养12～24小时后，充去上清，换入新鲜培养基继续培养。
按照以上步骤复苏的冻存细胞存活率高，生长及形态良好。
原创作者：江苏晶美生物科技有限公司
