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ELISA试剂盒的步骤采用方法
点击次数：202 发布时间：2015/6/23 10:17:17
商家名片
李*
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其基本方法是将已知的抗原或者抗体吸附在固相载体表面，并保持其免疫活性。然后抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，elisa试剂盒又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。
大家看到此过程中有一个“固相载体”，那就是酶标板。酶标板是一种配合在酶标仪上，用来做酶联免疫实验的耗材。虽然它看上去只是一块普通的有孔的塑料板，ELISA试剂盒但是在酶免疫测定中却是一个不可缺少的部分。所以可以知道，酶标板是一个不可缺少的中介，没有了这个中介，整个实验就无法进行操作。换一句话说，只要你用酶标仪做酶联免疫实验，就必然会用到酶标板。或不易得到足够的纯化抗原时，可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。
如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBELISA试剂盒一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。
原创作者：上海基免科研试剂网
