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ELISA试剂盒在实验操作进行中单个疑问总结
点击次数：204 发布时间：2017/7/6 10:27:09
严重溶血，elisa试剂盒以HRP为符号的ELISA测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色构成假阳性； 混有红细胞的血清 易堆积或附着在聚乙烯孔内不易洗净；如有 细菌污染 ，菌体中也许富含内源性HRP，也会发作假阳性反应； 标本凝聚不全 ，有时为了争夺时间迅速查看，常在血液还未初步凝聚时即强行离心分别血清，使血清中仍残留有些纤维蛋白原，在ELISA测定过程中能够构成肉眼可见的纤维蛋白块，易构成假阳性效果； 采血试管洗刷不完全 、重复运用易交叉污染； 塑料试管能吸附抗原物质 ，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降构成假阴性。
ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时查看，严重溶血标本禁用。一般说来，在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长致使血清IgG 聚合，使间接法的 试剂 本底加深。超越一星期测定的需－20℃保存。冻住血清融解后，蛋白质有些浓缩，分布不均，应充分混匀并避免发作气泡。
ELISA试剂盒混浊或有堆积的血清标本应先离心或过滤，澄清后再查看。重复冻融会使 抗体 效价下跌，所以测 抗体 的血清标本如需保存作屡次查看，宜少数分装冰存；最佳运用一次性玻璃试管或真空管采血管；并运用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，也许与高浓度肝素具有强壮的负电荷能吸附酶符号物不易洗脱有关；EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性；血液标本收集后有必要使其充分凝聚后再分别血清，或标本收集时用带分别胶的采血管或于采血管中参加恰当的促凝剂。
