真核生物的RNA加工

1.真核生物的RNA加工

    原核生物RNA转录出来就可以正常发挥功能。对真核生物来说，原始转录产物的加工是其正常发挥功能所必需的，是个复杂的过程。elisa试剂盒

2. mRNA转录后的加工

(1)剪接一个基因的外显子和内含子都转录在一条原始转录物RNA分子中，称为前体mRNA(pre-mRNA)。前体mRNA分子既有外显子顺序又有内含子顺序，还包括编码区前面及后面非翻译顺序。这些内含子顺序必须除去而把外显子顺序连接起来，才能产生成熟的有功能的mRNA分子，这个过程称为RNA剪接(RNA splicing)。一般来说，需要剪切的内含子的5ˊ和3ˊ末端分别含有GU和AG剪切识别位点。 

(2)加帽 几乎全部的真核mRNA的5端都具“帽子”结构(cap)。帽子结构是在转录产物5ˊ端以5ˊ一5ˊ连接方式添加一个7一甲基鸟苷三磷酸(m7Gppp)。首先从mRNA的5ˊ端去除一个磷酸盐基团，之后在这个5ˊ端磷酸基团上添加一个GTP，主要是在鸟苷酸转移酶催化下进行磷酸基团间的缩合反应连接起来的，最后，对此核苷酸进行甲基化。一般来说，RNA被加帽时长度只有20～40个核苷酸，此时转录周期刚刚进入起始和延伸阶段间的转变。mRNA的帽结构功能：①能被核糖体小亚基识别，促使mRNA和核糖体的结合；②m7Gppp结构能有效地封闭RNA的5ˊ末端，以保护mRNA的5ˊ端免受核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定；③有助于mRNA跨越核膜，进入细胞质。

(3)加尾 多数真核生物mRNA的3ˊ末端都具有由100～200个A组成的poly A尾。polyA尾不是由DNA编码的，而是前体mRNA以ATP为前体，由RNA末端腺苷酸转移酶．即ploy A聚合酶催化聚合到3ˊ末端。加尾并非加在转录终止的3ˊ末端。而是在转录产物的3ˊ末端．是由一个特异性酶识别切点上游方向13～20个碱基的加尾识别信号土AUAAA以及切点下游的保守顺序GUGUGUG．把切点下游的一段切除，然后再由poly土聚合酶催化，加上poly，A尾。ELISA试剂盒

2 .tRNA前体的加工

(1)tRNA前体的剪接 多数t．RNA前体分子内含有内含子，也需通过剪接作用才能变成成熟tRNA。tRNA前体的剪切作用与mRNA有所不同，是在两种不同酶的作用下完成的．即先由内切核酸酶催化进行剪切反应，再由连接酶将外显子连接起来。

(2)添加或修复3ˊ端CCA序列 tRNA前体在tRNA核苷酰基转移酶催化下，将3ˊ端除去两个U后，换上tRNA分子中统一的一CCA—OH末端，形成柄部结构。

(3)稀有碱基的生成tRNA前体的加工也存在着化学修饰反应，如通过甲基化反应使某些嘌呤生成甲基嘌呤，通过还原反应使某些尿嘧啶还原为双氢尿嘧啶(DHU)，通过核苷内的转位反应使尿嘧啶转变为假尿嘧啶核苷(Ψ)，通过脱氨反应使腺苷成为次黄嘌呤核苷酸。

3． rRNA前体的加工

(1)rRNA前体的剪接 rRNA前体在核仁中合成并被加工为成熟rRNA，这些成熟rRNA与核糖核蛋白形成核糖体，再运到胞质。rRNA前体的剪接是经过“自我剪接”(self—splicing)机制进行的：首先，由转录产物之外的鸟苷酸的3ˊ一OH攻击内含子5ˊ-剪接位点，使得二者共价连接；之后，外显子的3ˊ一OH攻击内含子的3ˊ-剪接位点，发生磷酸转移反应．结果上游外显子与下游外显子相连接，去除了内含子序列．成为成熟的rRNA。这种剪接不需要任何蛋白质参与，说明RNA本身就有酶活性，因此把具有酶活性的RNA称为核酶(ribozyrme)。ELISA试剂盒

(2)化学修饰rRNA前体加工的另一种主要形式是化学修饰，主要是甲基化反应。甲基化主要发生在核糖的2ˊ-OH。5S rRNA转录产物无需加工就从核质转移到核仁，与28S rRNA、5．8S rRNA以及多种蛋白质分子一起组装成为核糖体大亚基后，再转移到胞质。