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抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体（MCV）ELISA试剂盒检测说明
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上传时间：2016/7/20 9:40:00
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上 传 者：上海一研生物科技有限公司
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1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 80µg/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 40µg/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 20µg/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 10µg/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 5µg/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，
然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
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