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关于大鼠ELISA试剂盒实验中误差的解决办法

点击次数:264 发布时间:2018/4/2 9:07:56
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大鼠ELISA试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。ELISA试剂盒试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

但是您知道吗?大鼠elisa试剂盒如果您在实验过程中犯了以下几个小错误的话也会出现实验误差的哦!

1.做实验时少说话,防止唾液掉进酶标条中。

2.加入一抗二抗需要放入37°。

3.如果同时做多个板子,多个板子别罗一起;尽量少用排枪。

4.加样时,由低浓度向高浓度加,这样减少跳孔的几率。

5.勤换枪头。

一 移液器的使用,加样(抗体)等需要准确定量的试剂时不使用排枪,经验证明排枪很不准确,极易跳孔,不要图便宜买低档的tips 因为ELISA不但会放大被检测的目的蛋白,也会放大非特异结合的杂质蛋白。

二 倍比稀释样品时,稀释倍数最好要小于10。

三 所有的装跟大鼠ELISA试剂盒相关试剂的容器,玻璃制品的要干烤过或者使用一次性的树脂容器。

除了以上几点之外,以下的小细节也会帮您减少实验误差:

以上是本公司长期以来的实验总结,本公司专业生产、销售ELISA试剂盒,如您还有其它方面的疑问欢迎来电咨询!

ELISA试剂盒操作基本步骤:

1、 试剂准备:所有试剂在使用前应平衡至室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。

2、 加样:加样或加试剂时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内。推荐设置复孔进行实验。

3、 温育:为防止样品蒸发,实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的温育时间和温度。

4、 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最后的酶标仪读数。

5、 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请精确 配制标准品及工作液,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10 ),以避免由于不准确稀 释而造成浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。

6、 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

7、 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。

ELISA试剂盒补充说明:

1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。

2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。

3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。

4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

8. 有效期:6个月

原创作者:江苏菲亚生物科技有限公司

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