种属通用操作步骤与elisa试剂盒实验关系

elisa试剂盒操作步骤（通用）：

1. 加标准品：在酶标包被板上设标准品孔，ELISA试剂盒 依次加入不同浓度的标准品50ul（建议每个浓度做2个平行孔）人ELISA试剂盒。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。大鼠ELISA试剂盒在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀人ELISA试剂盒。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟ELISA试剂盒。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，大鼠ELISA试剂盒每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干小鼠ELISA试剂盒。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外ELISA试剂盒。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. ELISA试剂盒显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟人ELISA试剂盒.

10. 终止：每孔加终止液50μl，ELISA试剂盒终止反应（此时蓝色立转黄色）。

测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

本公司出售的任何产品均是保质保量，客户有任何疑问，均是一个工作日，给出解决方案！

ELISA试剂盒详细介绍：

包装规格：48T/96T

有效期：6个月

预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中相关物质含量。

1．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

ELISA试剂盒样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

原创作者：江苏菲亚生物科技有限公司