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肺炎衣原体利用Elisa法检测

点击次数:530 发布时间:2017/9/19 9:02:12
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来自江苏菲亚的研究总结:肺炎衣原体感染广泛存在于全世界,以隐性感染为主。其临床表现多样,主要引起人非典型肺炎,还可引起咽炎、支气管炎、虹膜炎、肝炎、心内膜炎及结节性红斑等,亦是艾滋病、白血病等疾病继发感染的重要病原,且与冠心病的发生相关,严重威胁人类健康。常见检查方法为ELISA法检测肺炎衣原体抗体。本司为您分析肺炎衣原体ELISA法检测步骤:

1.配制洗涤液 l瓶浓缩洗涤液加475ml蒸馏水。配好的洗涤液短期内可置室温环境中,长期可存于2—8℃环境中。

2.配制酶联物 按1:101倍稀释,即取1u1浓缩酶联物加酶联物稀释液1 000ul(根据检测标本数量确定稀释量),未用完的丢弃。
3.待试剂盒平衡至室温后,待测标本按1;51稀释,即取4tA血清与200u1标本稀释液混合。

4.将稀释标本置37℃环境中20min。

5. 各加100ul阳性、弱阳性、阴性对照及已稀释待测标本上清液于相应孔中,空白对照孔加100u1标本稀释液,盖好反应板,置37℃环境中30min。

6. 甩尽板中液体,每孔用200~300ul洗涤液洗5次,每次均需拍干。

7.每孔加酶联物100~1,盖好反应板,置37℃环境中30min。

8.甩尽板中液体,洗5次,每次拍干。

9. 加底物A、B各1滴或各50tzl,混匀,置37℃环境中15min。
10.取出,加终止液1滴,用酶标仪450nm测其OD值。若肉眼观察则不加终止液,直接判断结果。

注意事项:

1.本实验结果须结合临床表现、病史作出诊断后,方可采取适当临床处理。
2 . 试剂盒虽然含有消除干扰因子的物质,但仍可能有少量标本难以除尽干扰。因此,如某标本多项IgM均为阳性,应考虑RF的干扰。

原创作者:江苏菲亚生物科技有限公司

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