本文建立对乳制品中三聚氰胺的单四杆液质分析测定方法，以电喷雾离子化方式正离子模式监测，化合物的[M+H]+作为定量分析用的选择性检测离子,解决有时在液相分析时色谱分离不及定性信息不充分的问题, 从而避免液相色谱紫外测定时样品假阳性情况。

1. 实验及方法
1.1 装置概要
本实验使用Shimadzu LCMS-2010EV液相质谱仪，C-20AD输液泵，SIL-20AC自动进样器，CTO-20AC柱温箱,含LC-20AD输液泵，SIL-20AC自动进样器，CTO-20AC柱温箱，DGU-20A3在线脱气机, LCMSsolution 3.20工作站软件。

1.2 试剂
甲醇：　色谱纯
乙腈：　色谱纯
氨水：　浓度25%-28%
饱和乙酸铅溶液
缓冲液：配制含10mM柠檬酸和10mM辛烷磺酸钠的缓冲液，调节pH值到3.0
氨水甲醇溶液：量取5mL氨水，溶解于100mL甲醇中

1.3 样品处理
固体样品取样2g，液体样品取样5g，准确加入9mL缓冲液溶液，加入1mL乙酸铅溶液。摇匀，剧烈震荡25min，10000r/min离心5min，取上清液。分别用3mL甲醇，3mL水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，加入2mL（液体样品3mL）上清液上柱。依次用0.1mol/L盐酸水溶液3mL水和甲醇3mL洗柱，抽近干后用氨水甲醇溶液3mL洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，残渣用70％乙腈溶解，0.45um滤膜过滤，上机测定。

1.4 分析条件
色谱柱：CAPCELL PAK CR（1:4） 4.6×150mm ,5μm；
流动相：乙睛/10mM NH4Ac (50:50)，
   冰醋酸调节混合液至pH=3；
流速：    1.5mL/min (约0.3mL/min进质谱)；
柱温：    30℃；
进样量：10μL；
质谱参数：电喷雾离子化ESI(＋)，
   雾化气: 1.5L/min，
   干燥气: 0.1MPa，
   CDL 温度：250℃，
   加热块温度：200℃，
   检测器电压: 1.6 kV。

2. 实验结果
2.1 扫描方式结果见图1及图2

图1　 TIC (+)


图2 　SCAN (+) [M+H]+ m/z 127

2.2 标准曲线
三聚氰胺标准储备液：称取50mg（到0.1mg）的三聚氰胺标准品，用70%乙腈溶液溶解并定容于100mL容量瓶中，该溶液浓度为0.5mg/mL。
稀释标准储备溶液分别得到0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL, 10μg/mL,50μg/mL分别进样，得到校准曲线如图3所示。质谱分析中选择性离子监测方式(SIM), m/z 127

图3 标准曲线

　　标准曲线方程Y = 410,165.3X + 261,083.0 (Y- 峰面积) 相关系数为0.9996，线性关系良好, 检出限为50ppb

2.3   标准品精密度数据
取浓度为1μg/mL三聚氰胺标样，连续进样5次，结果如表1所示。

表1 保留时间与峰面积的重现性

　由表1结果可见，本方法测定三聚氰胺具有良好的精密度和重现性。

2.4   样品谱图结果
实际样品谱图结果见下图

图4 空白液态奶



图5 空白液态奶加标准品

3. 结论
岛津单四LCMS-2010EV分析乳制品三聚氰胺可以避免液相色谱紫外检测样品时假阳性结果, 并且其成本比使用串联质谱分析低, 可以很好的满足乳制品中三聚氰胺的分析测定要求。

我要索取联系方式