提供者:江苏菲亚生物科技有限公司 发布时间:2018/2/23 9:00:17 阅读次数:3005次 进入该公司店铺
一、原理
可溶性抗原(或抗体)吸附于免疫学反应无关的颗粒(称为载体)表面上,当这些致敏的颗粒与相应的抗体(或抗原)相遇时,就会产生特异性的结合,在电解质参与下,这些颗粒就会发生凝集现象。这种借助于载体的抗原抗体凝集现象就叫做间接凝集反应(Indirect agglutination reaction)。
载体的存在使反应的敏感性得以大大提高。间接凝集反应的优点为:①敏感性强:间接凝集反应是*敏感性的血清学反应方法,可以检测到微量的抗体和抗原;②快速:一般1h~2h即可判定结果,若在玻板上进行,则只需几分钟;③特异性强;④使用方便、简单。
二、载体
具有吸附抗原(或抗体)的载体很多,如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。
良好载体有如下几点基本要求:
①在生理盐水或缓冲液无自凝倾向;
②大小均匀;
③比重与介质相似,短时间内不能沉淀;
④无化学或血清学活性;
⑤吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性。
目前应用*广的是人的O型红血球和绵羊红血球。而后者应用更广,因为其来源方便。另外绵羊红血球的表面有大量的(约1000个以上)糖蛋白受体,极易吸附某些抗原物质,吸附性能好,且大小均匀一致。
三、间接凝集的分类
1、根据载体的不同,可分为间接炭凝、间接乳胶凝集和间接血凝等。
2、根据吸附物不同可分为间接凝集反应(吸附抗原)和反向间接凝集反应(吸附抗体)。
3、根据反应目的不同,又可分为间接凝集抑制反应和反向间接凝集抑制反应。
4、根据用量和器材的不同又可分为试管法(全量法)、凹窝板法(半微量法)和反应板法(微量法)。
ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
江苏菲亚生物科技有限公司提供凝集实验,ELISA,免疫组化,WB等各种免疫学实验,客户遍及全国各大科研单位院校医院等,欢迎广大科研工作者来电咨询,我们将提供完善的售前售后技术服务。
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