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TTC染色法检测心肌梗死

提供者:上海初态生物科技有限公司   发布时间:2022/8/6 12:37:19  阅读次数:931次   进入该公司店铺

 简介

对于缺血再灌注或冠脉结扎致心肌梗死的小鼠模型,使用 TCC 染色定义心肌梗死面积。

 

材料与仪器

器材:
 
解剖工具等。
 
试剂:
 
① 2% 伊文思蓝(Evans Blue)(2 g Evans Blue 粉剂,充分溶解于 PBS 缓冲液,室温避光保存);
 
② 2% 红四氮唑(TTC)(称取 2 g TTC 粉剂,溶解于 PBS 缓冲液,室温避光保存)。
 

步骤

TTC 染色法检测心肌梗死的基本过程可分为如下几步:
 
A 对于用于检测的心脏,如梗死手术后或体外缺血再灌注的心脏,从主动脉连续灌注 2% 伊文思蓝 3~4 ml,整齐地放在冰冷的铁板上,- 20 ℃ 保存过夜。
 
B 取出冷冻的心脏,在冷冻状态下用预冷的锋利刀片沿左心室长轴将心脏均匀地连续切片,使每片厚 2~3 mm。然后将切取的心脏厚片置于 2% TTC 溶液中,37 ℃ 孵育 15 分钟。完成后取出心肌片,PBS 漂洗片刻,整理平整后于 4% 甲醛溶液中固定。
 
染色后的心肌片正常呈 3 种不同的颜色,蓝色为正常心肌组织,红色为缺血心肌组织,灰白色为坏死心肌组织。通过拍照后统计不同小鼠相同位置切片上不同染色的面积比例,定义心肌梗死程度。结果示例如图 8-5-8 所示。

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