支原体是一种细胞培养实验中极其常见的污染物,污染发生的概率>50%。由于它们非常小,增长速度缓慢,污染不容易用常规方法发现。但是支原体可以对任何污染的细胞造成影响,大量的污染存在,将对宿主细胞的结构、功能造成巨大影响,从被支原体污染的培养细胞中得到的实验数据是不准确的及难以重复的,所以及时有效的对支原体污染进行预防、检测以及处理,将会得到事半功倍的效果。
EZ-PCR 支原体污染检测试剂盒
货号 :20-700-20
规格 :20 次
储存条件: -20℃
保质期 :36 个月
支原体(Mycoplasma)是一种原核微生物,无细胞壁,因此对抑制细胞壁合成
的青霉素并不敏感。支原体有数千种之多,以寄生或腐生营养方式,广泛存在于
环境之中,并有多种可存活在人体生殖、泌尿与呼吸道中。
支原体污染的严重性:
1. 阻滞蛋白合成,细胞分裂与生长;
2. 影响免疫反应;
3. 影响病毒增殖;
4. 染色体异常和位移;
5. 改变细胞膜/壁(植物细胞)完整性;
6. 细胞分离物中,支原体能占高达50%的蛋白质和15-30%的DNA;
7. 电转染率下降。
直接的培养法检测支原体过程复杂,需耗时数周,而且检测灵敏度低,因此支原
体比其他污染更隐蔽。PCR 因其高敏感性、明确及快捷的特点简化了细胞培养
中支原体污染检测过程。EZ-PCR 方法检测支原体,检测用的样品仅经过离心分
离及悬浮在缓冲液中即可开始PCR 反应。琼脂糖凝胶电泳后,阳性模板得到一个
270bp 的片段,整个过程大概需要3-4 个小时。
高敏感性及特异性的支原体种类如下:
Mycoplasma arginini Mycoplasma pirium
Mycoplasma arthritidus Mycoplasma pneumoniae
Mycoplasma bovis Mycoplasma pulmonis
Mycoplasma capricolum Mycoplasma salivarium
Mycoplasma fermantans Acholeplasma spp.
Mycoplasma hominis Spiroplasma spp.
Mycoplasma hyorhinis Mycoplasma orale
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