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细胞名称： HUVECS人脐静脉内皮细胞（带STR鉴定及对比）

  细胞冻存方法

主要操作步骤为：

（1）选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天*换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心（1000r/min，10分钟）。

（2）去上清液，加入含20%小牛血清的*培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×106～1×107/mL之间。

（3）将上述细胞分装于安瓿或冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要*封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记（日期、细胞种类及代次、冻存支数）。

（4）将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内；置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时（此步可省略），再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，蕞后沉入液氮中。

细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，*取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

HUVECS人脐静脉内皮细胞（带STR鉴定及对比）

2BS       人胚肺二倍体细胞

293（HEK-293；HEK293）人胚肾细胞  

293 Ad5人原胚肾转化细胞

2V6.11人胚肾细胞

BEAS-2B人正常肺上皮细胞           

Caco-2人结直肠腺癌细胞  

Caov-3人乳头状卵巢腺癌细胞

C918人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞      

CNLMG-B5537SKIN      人类成纤维细胞

CNLMG-B5538LC   人永生化淋巴细胞

CNLMG-B5538SKIN      人类成纤维细胞

CCC-ESF-1人胚皮肤成纤维细胞     

CCC-HB-2人胚膀胱组织来源细胞   

CCC-HBE-2人胚气管组织来源细胞

做细胞实验的同学看过来。原装ATCC细胞现货来啦。 

选择上海青旗生物细胞有3个理由：

1、细胞状态好，形态佳，易成活，是市面上比较好养的细胞;

2、物流迅速，复苏好后发货，次日就能到;

3、使用我司的进口品牌血清进行培养实验，效果更佳。

专业技术人员李工收藏的细胞培养小技巧:

1. 买细胞要去靠谱的地方买，比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。

2. 不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。

3. 发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快，比如说 MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分就已经足够了。有的又是特别慢，比如 BT474，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

5. 对于娇弱的细胞，就得细心呵护。胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住，是每天。

细胞培养常见问题及解决方法

 ★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料直接call，对您造成的不便还请见谅！
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*后，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么较可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。