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水溶性维生素及其代谢物分析-- LC/MS/MS

2020/5/21提供者: 上海斯迈欧分析仪器有限公司 人气指数:66 进入该公司展台

摘要 :使用配备 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱的 LC/MS/MS 分析了水溶性 维生素及其代谢物,考察了不同 pH 值的各种流动相添加剂的影响。使用 10 mmol/L 乙酸铵和乙腈作为流动相,在中等 pH 值条件下获得了最佳总体性能。使用带有 PEEK 内衬的色谱柱硬件和 InfinityLab 去活剂添加剂可提高对磷酸化化合物的分析 性能。

前言 :对水溶性维生素及其代谢物进行全面分 析的需求日益增加。大多数分析物为小 分子高极性化合物,不能很好地保留在 反相色谱柱上。InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱采用表面多孔颗粒填料技 术,是保留这类化合物的理想选择。本 应用简报使用 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱和 Agilent 6460 三重四极 杆 LC/MS 系统分离了 24 种维生素及其 代谢物。使用 Poroshell 120 HILIC-Z 色谱 柱考察了不同流动相添加剂的影响。此外 还考察了同时使用具有 PEEK 内衬的色谱 柱硬件和 InfinityLab 去活剂添加剂(一种 用于减少与活性金属表面相互作用的流动 相添加剂)时的效果。将上述结果与标准 磷酸清洗方案以及不使用任何钝化策略的 传统色谱方法进行了比较。

实验部分 :试剂与化学品 所有试剂均为 HPLC 级或更高等级。HPLC 级乙腈购自 J. T. Baker (Center Valley, PA, USA.)。水经由 ELGA PURELAB Chorus 系 统 (High Wycombe, UK) 纯化。甲酸、乙 酸、乙酸铵和氢氧化铵购自北京百灵威科 技有限公司。所有维生素和代谢物标准品 (表 1)均购自安谱公司(中国上海)。按 表 1 的浓度和溶剂配制标准储备液通过混合各个储备液并采用乙腈进行稀 释,配制混合溶液。表 1 列出了所有组 分的单独浓度。

设备与材料 • 色谱柱进样口:Agilent InfinityLab Quick Connect 快速连接液相色谱接头 (部件号 5067-5965) • 色谱柱出口:Agilent InfinityLab Quick Turn 液相色谱接头(部件号 5067-5966) • Agilent Captiva 经济型过滤器,PTFE 膜,直径 13 mm,孔径 0.2 µm(部 件号 5190-5265)• 安捷伦样品瓶,螺口,棕色,带书 写签,经认证,2 mL(部件号 5182- 0716) • 安捷伦固定螺口盖,蓝色,带 PTFE/ 红色硅胶隔垫(部件号 5190-7024) • Agilent InfinityLab 溶剂瓶,棕色, 1000 mL(部件号 9301-6526) • Agilent InfinityLab Stay Safe 溶剂瓶 安全盖,GL45,3 口,1 个放空阀 (部件号 5043-1219) • Eppendorf 移液管和重复用移液器 • 超声仪 (VWR, Radnor, PA, USA)

仪器 • Agilent 1290 Infinity II 高速泵 (G7120A) • Agilent 1290 Infinity II Multisampler (G7167B) • Agilent 1290 Infinity II 高容量柱温箱 (G7116B) • Agilent 6460 三重四极杆液质联用系 统 (G6460A) 软件 • Agilent MassHunter LC/MS 数据采集 软件,版本 B.08.02 • Agilent MassHunter 定性分析工作站 软件,版本 10.0

微信号:ayiwangapp17

标签:液质联用  

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