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犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒

犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒

点击次数:667  发布时间:2013-8-4[更新时间:2016-8-22 10:30:37]

  • 型 号:
  • 价 格:面议
  • 所在地点:中国大陆
  • 产品完善度:

简单介绍: 上海信帆生物,试剂盒年中特卖,所有产品一律7折起售.试剂盒性能稳定,操作方便,灵敏度高!全程提供技术指导,有质量问题,免费包退换,提供免费代测服务,欢迎联系!
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| 产品简介

 

产品中文名称: 犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒
产品英文名称: Canine cluster of differentiation 8,CD8 ELISA kit
规格: 48T/96T
检测方法: 双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)
标本: 血清,血浆,细胞上清液,组织等
种属: 犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒
试剂盒说明书: 请来电或者邮件索取
 
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒
实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟,微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 洗液的配制:按 1:100的比例配制洗液备用。 样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集上清液,以1000×g离心15
分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞 3次,调整细胞浓度达到10^4-10^6/ml左右,通过反复冻融,
使细胞破坏,并放出细胞内成份。或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清: 在室温 下, 血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置 10 -20 分钟后,
以1000×g离心15分钟,收集上清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集 ,以 1000×g
离心、15 分钟 ,收集上清。
6. 组织标本:切取 组织标本,称取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,超声破碎仪,
将标本匀浆,以2000 -300rmp离心 20 分钟 ,收集上清进行检测 。
7. 样品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。
8. 保存 :如果样品不能立即检测,应将其分装,-80 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现
沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心
或过滤。不要在 37 ℃或更高的温度加热解 或更高的温度加热解 或更高的温度加热解或更高的温度
加热解或更高的温度加热解冻。应在室温下解并确保样品均匀地充分解冻。
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒
操作步骤 :
1. 取出 试剂盒,室温( 20 -25 ℃)放置 30 分钟。
2. 分组: 取出 96 孔板 根据待测样品数 量加上标准品的数量决定所需板条,把剩余的板条继续
冷藏处理,分别设标准品组(6个浓度)、空白 孔、待测样品组。 
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入100ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入100ul的
蒸馏水;其余微孔中加入100ul的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul 的酶标溶液 (空白对照孔除外)。
5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37 ℃恒温孵育恒温孵育 1小时。
6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15 -30s 30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
7. 显色:各孔加入显色剂A液 50ul 后,再加入显色剂 B液 50ul 。
8. 终止: 25 -37 ℃下避光反应10 -15分钟, 加入 50 ul 终止液。
9. 读板:在 450nm波长读取各孔的O 值。注: 读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,
读板时间控制在终止反应后的30 分钟内,以免影响准确性。
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒
数据计算
1. 绘制标准曲线:各标准品 OD 值减去底色即坚强空白孔OD 值(数据处理如下),绘制标准曲线图。
1.1软件处理:建议用户使logit-log模式或四参数据处理模式( y=(a-d)/(1+(x/c)^b)+d )
1.2计算器或手工作图处理:Logit-log 计算:以6个标准品OD 值的 Logit为纵坐标 y,以标准品的
浓度的 log值为横坐标X,绘制曲线图。logit值计算公式如下:logit=ln(B/ B0)(1-B/ B0)手工
作图:以标准浓度取log值为横坐标,对应的logit值为纵坐标,在普通坐标纸上或以标准浓度为
横坐标,对应的 B/B0B为纵坐标在 logit-log坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直)。
2. 根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意:如果使用普通坐标纸,查出的
数值应取反对数才是最后浓度值。 
3.敏感度:1.0µmol/L
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA 试剂盒
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上海信帆实验室代测项目:放免代测,免疫组化代测,荧光定量PCR代测,病理细胞染色代测,
WB实验,蛋白表达与纯化,ELISA酶联免疫代测等

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