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如何选折流式荧光？
点击次数：6080 发布时间：2013/5/3 12:46:47
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邹**
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1.紫色激光器荧光染料 - 405 nm 激发
| 名称 | 激发光波长（nm） | 发射光波峰（nm） | 相对强度（1 =最低,5 =最高） | 用途和用法 |
|---|---|---|---|---|
| eFluor® 605NC | 405 | 605 | 2 | 紫光激光器激发 可以完好的替代 Pacific Orange®. eFluor® 605NC 可以与 eFluor® 450联合使用 适用于丰度较高的抗原 |
| eFluor® 625NC | 405 | 625 | 2 | 紫光激光器激发 eFluor® 625NC 可以与 eFluor® 450联合使用 适用于丰度较高的抗原 |
| eFluor® 650NC | 405 | 650 | 3 | 紫光激光器激发 eFluor® 650NC 可以与 eFluor® 450联合使用 适用于丰度较高的抗原 |
| eFluor® 450 | 405 | 450 | 2 | 紫光激光器激发 eFluor® 450 可以与 Pacific Blue®交替使用 能与 eFluor® 605NC 或 eFluor® 625NC一起使用 适用于丰度较高的抗原 |
| Alexa Fluor® 405 （eBioscience无该荧光抗体） | 405 | 421 | 1 | 紫光激光器可以激发很弱的荧光 只适用于高丰度的抗原 |
| Pacific Blue® （eBioscience无该荧光抗体） | 405 | 455 | 2 | 紫光激光器激发 Pacific Blue® 可以与 eFluor® 450交替使用 典型的弱荧光基团 只适用于高丰度的抗原 |
| Alexa Fluor® 430 （eBioscience无该荧光抗体） | 405 | 541 | 1 | 仅供作为紫光管的备用荧光物质 |
| Pacific Orange® （eBioscience无该荧光抗体） | 405 | 551 | 1 | 只适用于高丰度的抗原 由于Pacific Orange®发射光波长为551nm可以与 Pacific Blue® 共染进行多色流式细胞分析 eFluor® 605NC 是荧光较强的替代品 |
2. 绿色和黄/绿色激光器的荧光染料 -532 - 561 nm 激发
| 名称 | 激发光波长（nm） | 发射光波峰（nm） | 相对强度（1 =Lowest,5 =Highest） | 用途和用法 |
|---|---|---|---|---|
| Alexa Fluor® 532 | 532 | 561 | 3 | 用于配有合适的滤光片通道的流式细胞仪 光耐受强 并且不依赖于PH值 是荧光显微镜技术的最佳选择 |
| R-PE （R-Phycoerythrin） | 532 - 561 | 578 | 5 | 多数仪器使用FL2通道检测 可以产生较高的光量子，适用于表达丰度较低的抗原检测 易受光萃灭 |
| PE-Texas Red （eBioscience无该荧光抗体） | 532 - 561 | 615 | 3 | 单激光流式细胞仪在FL3通道检测 |
| PE-Cy5 | 532 - 561 | 667 | 4 | 多数仪器在FL3或FL4通道检测 与APC共用时需要调整较大的荧光补偿，所以不建议二者共用 |
| PE-Cy5.5 | 532 - 561 | 695 | 3 to 4 | 多数仪器在FL3或FL4通道检测 能和APC共用，但仍需调补偿，是双激光器流式细胞仪的最佳荧光 |
| PE-Cy7 | 532 - 561 | 785 | 3 | 用于配有合适的滤光片通道的流式细胞仪 与其他荧光共用的时候有微小的干扰，需要微调荧光补偿 |
3.蓝光激光器荧光染料 - 488 nm 激发
| 名称 | 激发光波长（nm） | 发射光波峰（nm） | 相对强度（1 =最低,5 =最高） | 用途和用法 |
|---|---|---|---|---|
| FITC （Fluorescein Isothiocyanate） | 488 | 518 | 3 | 大多数仪器在 FL1 通道检测. 适用于荧光显微镜技术 |
| Alexa Fluor® 488 | 488 | 519 | 3 | 大多数仪器在 FL1 通道检测. 具有耐光性和PH依赖性 是荧光显微镜技术的绝佳选择 |
| R-PE （R-Phycoerythrin） | 488 | 578 | 5 | 大多数仪器在 FL2通道检测. 具有很高的光量子产量，适用于低丰度抗原检测 易淬灭 |
| PE-Texas Red （eBioscience无该荧光产品） | 488 | 615 | 3 | 单激光管FL3通道检测 |
| PE-Alexa Fluor® 610 （eBioscience无该荧光产品） | 488 | 628 | 3 | PE-Texas Red 荧光染料的替代品与PE的荧光补偿较小，对FC介导的非特异性结合较PE-Cy5小. |
| PE-Cy5 | 488 | 667 | 4 | 多数仪器在FL3或者 FL4 通道检测 当用于双激光器仪器的 APC 通道时需要注意调节激光器之间的荧光补偿 光淬灭性强，不适用于传统的荧光显微镜技术 可与FITC，PE搭配，荧光补偿较小；不宜与APC搭配 |
| PE-Cy5.5 | 488 | 695 | 3 to 4 | 多数仪器在FL3或者 FL4 通道检测 光淬灭性强，不适用于传统的荧光显微镜技术 可与FITC、PE、APC搭配，荧光补偿较小、 |
| PerCP-Cy5.5 | 488 | 695 | 3 | 多数仪器在FL3或者 FL4 通道检测 可与FITC、PE、APC搭配，荧光补偿较小 量子产量较低，最好用于高丰度抗原的检测 |
| PerCP-eFluor® 710 | 488 | 710 | 4 | 多数仪器在FL3 通道检测 是PerCP-Cy5.5光量子产量的2-3倍 |
| PE-Cy7 | 488 | 785 | 3 | 选用合适的滤光片 BECKMAN用FL4通道检测，BD仪器用FL3通道检测。 可与FITC、PE、APC搭配，与FITC无重叠，与PE和APC荧光补偿较小 光淬灭性强，染色处理时要注意避光 |
| 7-AAD | 488 | 647 | －－ | 多数仪器在FL3 通道检测 能够选择性的与DNA的G-C碱基结合 用于区分死细胞和活细胞 |
| Propidium Iodide （PI） | 488 | 617 | －－ | 在FL2 通道检测 室一种嵌入性核酸荧光染料，可选择性的嵌入DNA和RNA的碱基对中。 用于区分死细胞和活细胞 利用PI进行细胞周期分析的时候需要对细胞进行固定和破膜。 |
4.红光激光器荧光染料 - 633 nm 激发
| 名称 | 激发光波长（nm） | 发射光波峰（nm） | 相对强度（1 =最低,5 =最高） | 用途和用法 |
|---|---|---|---|---|
| APC （Allophycocyanin） | 633 | 660 | 4 | 适用于配备氦氖激光器或红色二极管激光器的流式细胞仪，BD仪器在FL4通道检测，Beckman仪器在FL3通道检测 可代替Cy5 或Alexa Fluor® 647 |
| eFluor® 660 | 633 | 660 | 4 | eFluor® 660 是 Alexa Fluor® 647的替代荧光 在双激光器仪器的FL4通道检测 可以替代APC 光稳定性好，适合于荧光显微镜技术 |
| Alexa Fluor® 647 | 633 | 668 | 4 | 在双激光器仪器的FL4通道检测 可代替Cy5 或Alexa Fluor® 647 光稳定性好，适合于荧光显微镜技术 |
| Cy5 | 633 | 670 | 3 | 在双激光器仪器的FL4通道检测 可与APC 或Alexa Fluor® 647互换使用 是胞内染色和荧光显微镜技术的最佳选择 |
| APC-Cy5.5 （eBioscience无该荧光抗体） | 633 | 690 | 3 | 选择适合的通道 多用于四色流式细胞染色 |
| Alexa Fluor® 700 | 633 | 723 | 2 | 虽然氦氖激光器不能较好的激发，但是仍会有一定的荧光发射光 需要选用合适的滤光片 多数仪器需要 685 LP 反射镜and 710/20 滤波器 |
| APC-eFluor® 780 | 633 | 780 | 2 | 需要选用合适的滤光片 光稳定性较APC-Cy7好。 APC 分子 与eFluor® 780偶联而成的荧光染料 APC-Cy7, APC-Alexa Fluor® 750 和 APC-eFluor® 780 可以互换使用。 |
| APC-Alexa Fluor® 750 （eBioscience无该荧光抗体） | 633 | 775 | 2 | 需要选用合适的滤光片 光稳定性较APC-Cy7好。 APC 分子 与eFluor® 750偶联而成的荧光染料 A APC-Cy7, APC-Alexa Fluor® 750 和 APC-eFluor® 780 可以互换使用。 |
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