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技术文章

ELISA常用检测法—竞争法原理介绍

点击次数:12856 发布时间:2017/5/17 10:02:29

    做ELISA实验,有几种常见的实验方法,他们分别是竞争法、捕获法、间接法、夹心法、而夹心法又可以分为双抗体夹心法和双抗原夹心法!在今天的文章中,将详细得跟大家讲述竞争法的实验原理!


    竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法,这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法,其基本原理是:将合适浓度的包被抗体包被于微孔板中,加入无关蛋白载体封闭未结合位点,加入标准品(样本)和生物素标记的抗原物质进行竞争结合,经合适的温度和一定时间的孵育,洗涤后,加入HRP标记的链霉亲和素进行反应,TMB显色,微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈负相关。
 
    该方法一般用来检测具有较少表位的小分子物质,当然,这种方法也可以用来检测大分子抗原物质甚至是抗体。检测大分子抗原物质时,由于空间位阻的影响,使得该检测方法没有双抗体夹心法检测大分子抗原物质灵敏度高。这种方法在检测抗体时,可能由于两种竞争的抗体来源不一,导致两种抗体趋同性不高,就使得检测结果的可靠性不高。

原创作者:上海elisa生物技术有限公司

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