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NanoDrop 2000 超微量分光光度计

点击次数:1485发布时间:2014/8/15

NanoDrop 2000 超微量分光光度计

更新日期:2022/5/30 14:58:13

生 产 地:美洲

产品型号:

简单介绍:ND-2000是目前国内外实验室中使用*为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评

详细内容

 一、产品应用

      ND-2000是目前国内外实验室中使用*为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。

      该产品可用于以下几个方面:

* 紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;

* 核酸检测:可检测dsDNAssDNARNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm280nm处的吸光值;

* 探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;

* 细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;

* 蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;

* 蛋白标记检测:可检测被BCABradfordLowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。

 

二、 产品简介
     NanoDrop 2000
超微量分光光度计是NanoDrop的*新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。

      NanoDrop 2000
使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。

      
待测样品的均质性是NanoDrop 2000的要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为*佳,若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。

     
检测时选择不同检测模式,可以得到*快速的结果:
● Nucleic Acid –
吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)260/280 ratio260/230 ratio及核酸浓度。

● UV-Vis – 190~840nm
间所有波长的吸收值及光谱(1mm光径吸收值呈现)

● A280
蛋白质定量法 – 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。

● BCA
BradfordLowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。

*
蛋白质检测模式目前提供BCABradfordLowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在*佳时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线*多可有七个标准品,每个标准品*多可做五重复。

*
测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸(编号: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。


浓度范围:

 

样品种类

浓度

浓度

(超过时请稀释样品)

再现性 (五重复以上)

核酸

2 ng/ul

15000 ng/ul (dsDNA)

12000 ng/ul (RNA)

浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD ± 2 ng/ul

浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV ± 2%

BSA

0.10 mg/ml

100 mg/ml

浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD ± 0.10 mg/ml

浓度大于 10 mg/ml 时,CV ± 2%

蛋白质,以BCA方式定量

0.2 mg/ml

8.0 mg/ml

CV± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)

蛋白质,以modified Lowry方式定量

0.2 mg/ml

4.0 mg/ml

CV± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)

蛋白质,以Bradford方式定量

100 ug/ml

8000 ug/ml

浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD ± 25 ug/ml

浓度大于 500 ug/ml 时,CV ± 5%

蛋白质,以Mini Bradford方式定量

15 ug/ml

100 ug/ml

浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD ± 4 ug/ml

浓度大于 50 ug/ml 时,CV ± 5%

 

三、技术参数:   

1、波长范围: 190-840nm   

2、波长精度: 1nm   

3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm)   

4、其它: 1mm光程长度(可自动调整到0.05mm)   

5、检测下限:2ng/μl(dsDNA)   

6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA)   

7、吸光率精确度:0.002 absorbance (1mm光程)   

8、吸光率准确性:2%(at 0.76 at 257 nm)    

9、吸光率范围:0.02-300 (相当于10mm光程)   

10、核酸检测周期:< 5s   

11、体积:14cm×20cm

 

四、使用方法举例:

dsDNA:在主画面点选Nucleic Acid,计算机与仪器自动完成联机。依照DNA所溶于之液体准备该溶液(务必确认DNA溶于二次水、TE buffer或哪一组kitelution buffer)取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Blank。在右上方拉选Sample Type DNA-50,在Sample ID位置输入样品名称,将样品混匀,取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Measure

 

五、结果整理:

 NanoDrop2000 软件在侦测一开始会询问档案欲存至何处,若未指定,则档案会存在上一个使用者的档案内。

 

六、注意事项:

1. 侦测后立即使用拭镜纸(Kimwipe)擦拭台面。先取一张将上下台面的液体吸走,再将此laboratory wipe吸过样品的面反折到内部,折迭四次后以单方向多次擦拭台面(DNA 5次,Protein 20)

2. 同一滴液体只能做一次侦测,欲重复定量同一样品,请擦掉前一滴,重新取出一滴进行侦测。

3. 基本上核酸样品可使用1~2ul做测量,随各液体体积特性之不同会有不同体积需求,原则上不超过 2ul。并请使用2ul pipette避免体积不足导致液柱无法完整形成。唯蛋白质样品因呈色剂与蛋白质本身特性,务必使用2ul进行侦测。

4. 当软件跳出错误讯息时,请详细阅读并依指示进行障碍排除。*常发生的情形是在侦测过程液柱并未正确形成,软件会出现以下讯息。可先用肉眼观察液柱是否未完整连接上下台面,或样品内有泡泡,将上臂拉起后,擦掉该滴样品,再重新进行侦测,必要时可将样品体积加大至2ul

5. 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之腐蚀样品,其它无腐蚀性之液体皆可使用。

 

七、日常与定期维护:

* 平时保持台面及仪器本身清洁。

* 定期校正。

 

工欲善其事,必先利其器;

Nanodrop2000,帮您测OD,只要两微升。

 

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