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人癌胚抗原,人癌胚抗原ELISA试剂盒的操作步骤

点击次数:406 发布时间:2012/11/15 10:03:22
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人癌胚抗原,人癌胚抗原ELISA试剂盒的操作步骤

上海泛柯长期供应ELISA试剂盒,生物试剂等科研产品,人癌胚抗原,人癌胚抗原ELISA试剂盒是我司人ELISA试剂盒系列之一,本试剂盒是专门测定人血清、血浆及相关液体样本中人复制蛋白A 的含量。本公司长期供应:ELISA试剂盒,生物试剂等科研产品。

人癌胚抗原,人癌胚抗原ELISA试剂盒操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120 ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
60 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
30 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
15 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5 ng/L1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

原创作者:上海科兴生化试剂

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