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技术文章
实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术服务-华夏远洋明星产品
点击次数:990 发布时间:2012/12/28 10:23:17
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| 服务编号 | 服务项目 | 实验说明 | 价格 | 周期 |
| HX-R1 | RNA提取 | 包括RNA提取、DNase I消化残留的DNA、RNA电泳 | 100元/样品 (样品大于30个半价) | 2-6个工作日 |
| HX-R2 | 反转录 | 反转录、内参基因测试 | 80元/样品 (样品大于30个半价 | 2-6个工作日 |
| HX-T1 | 探针合成 | 探针设计、合成、验证 | 2000元/基因 | 5-10个工作日 |
| HX-S1 | 相对定量-染料法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复,数据分析。 | 180元/基因·样本 (10个样品以上起做) | 5-15个工作日 |
| HX-S2 | 相对定量-TaqMan探针法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复,数据分析 | 180元/基因·样本 (10个样品以上起做) | 5-15个工作日 |
| HX-S3 | 绝对定量染料法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复,数据分析 | 180元/基因·样本 (10个样品以上起做) | 5-15个工作日 |
| HX-S4 | 绝对定量TaqMan探针法 | 引物设计、合成、验证、上机检测、3次实验重复,数据分析 | 180元/基因·样本 (10个样品以上起做) | 5-15个工作日 |
| HX05 | 构建标准品 | PCR扩增、纯化、OD值检测、浓度计算 | 600元/基因 | 2-6个工作日 |
| HX06 | 标准曲线 | 制作标准曲线 | 800元/基因 | 2-6个工作日 |
背景知识:实时荧光定量PCR(Real-time PCR)即通过荧光染料或荧光标记的特异性探针对PCR反应过程进行实时监测,根据PCR指数扩增期间荧光信号的变化来即时测定对应特异产物的含量,并据此推断目的基因的初始量。该方法可以检测细胞、组织或微生物中基因表达变化,比较不同组织的mRNA表达差异。如不同药物浓度处理后相关基因表达水平高低变化;验证基因芯片结果;siRNA干扰的实验结果等。与常规PCR(RT-PCR)相比,实时荧光定量PCR具有极高的灵敏度、高度的重复性和极佳的特异性。因为PCR扩增过程闭盖操作,避免了反应产物的污染,大大提高了结果的可靠性,现已成为现阶段国际公认的核酸分子定量检测的金标准,在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用。
技术流程
一、RNA的提取
二、DNase I 消化RNA中残留的DNA
三、琼脂糖凝胶电泳,判断RNA的质量
四、RNA反转录为cDNA
五、引物设计、合成、验证,反应体系和反应条件优化
六、上机检测:包括扩增曲线、溶解曲线
七、数据整理、表达量计算、作图
八、实验报告的书写:包括详细的仪器、耗材、试剂、引物信息、反应体系、实验条件、实验 图片、实验数据及结果分析。
二、DNase I 消化RNA中残留的DNA
三、琼脂糖凝胶电泳,判断RNA的质量
四、RNA反转录为cDNA
五、引物设计、合成、验证,反应体系和反应条件优化
六、上机检测:包括扩增曲线、溶解曲线
七、数据整理、表达量计算、作图
八、实验报告的书写:包括详细的仪器、耗材、试剂、引物信息、反应体系、实验条件、实验 图片、实验数据及结果分析。
送样要求:细胞(≥106)、组织(≥100mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA或总RNA(体积≥20μl,浓度≥50 ng/μl)。外地客户可以干冰邮寄,北京客户直接联系公司取样。
背景资料:客户提供物种信息、GeneBank号、目的基因名称或特异基因的序列。
提供结果:实验所用所有仪器试剂及耗材、引物序列;RNA电泳图和PCR特异性电泳图;详细的实验过程;原始数据(包括扩增曲线和熔解曲线)及数据分析结果。
特别声明:本公司所用荧光定量PCR仪为伯乐(BIO-RAD)公司仪器,所用耗材为白色低腰八联排管,所用试剂为SYBR Green I 的升级替代产品Eva Green;论文可发表在国外任何影响因子的刊物上;实验中,客户可以随时来参观学习询问;根据客户要求每个反应免费重复2-3次。样本在60个以上,基因3个或以上(含内参)时,RNA提取和反转录项目免费。
具体优惠方式和细节您可以来信或来电咨询。
收款方式:本公司所有科研服务均收取50%预付款,实验完成后,1个月内结清尾款。
原创作者:北京华夏远洋科技有限公司


