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O157显色培养基

点击次数:429 发布时间:2017/2/20 11:17:42
 

O157显色培养基
O157 chromogenic medium

 
用途:用于O157菌的显色培养,O157菌显亮红色、淡红色或红色

大肠杆菌O157:H7显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、病人粪便样品中O157:H7菌的快速检测。O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈,大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色。本培养基的特异性高,可以克服SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。

成份 (g/L)

 

特殊营养物质

 68.4 

混合显色剂

2.6

琼脂

15.0

pH 7.0 ± 0.1 25 ℃

 

CT 添加剂 1ml/ 支 *5

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*佳的结果。

注意

此培养基仅供实验室使用。

用法

称取本品 17.2g加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热2分钟左右。冷却至 45-50 ℃时,加入 CT 添加剂混匀,
倾入无菌平皿。

注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 36±1℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。

贮存

制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。

失效

干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

操作步骤

 

1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;

2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中, 36±1℃ 增菌培养 18-24 小时;

3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到 O157 菌显色培养基上,做 2 个平板;

4 、 36±1 ℃培养 18-24h , O157:H7 菌显亮红色,淡红色或红色 ,菌落周围没有蓝色晕圈 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色, 其它细菌显蓝色、黄色或无色;

5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。

 注:必须在 36±1℃ 培养 24 小时内判读结果,以免菌落颜色发生变化。

质量控制

1 、外观

此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡蓝色。制备好的平板呈蓝色色固体培养基。

2 、微生物试验

在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:

 

质控菌株

ATCC

生长情况

菌落颜色

大肠杆菌 O157

35150

+++

亮红色 

金黄色葡萄球菌

25923

-/+

黄色 或无色

大肠杆菌

25922

+++

暗蓝色,菌落周围有晕圈

沙门氏菌

14028

+++

蓝色

奇异变形杆菌

12453

+/-

无色

 

方法的局限性

本培养基对典型大肠杆 O157:H7 必须做血清学试验或生化试验。

典型特征

典型大肠杆菌O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;

 

参考文献

 

1、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.

2. U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD.

原创作者:上海源叶生物科技有限公司

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