ELISA（酶联免疫吸附试验）试剂盒是一种基于免疫学反应的试验技术，它将抗原和抗体的特反应与酶的催化作用相结合。ELISA 试剂盒主要用于检测特定抗原或抗体在样本中的含量。下面是 ELISA 试剂盒的操作步骤： 

大鼠Ki-67蛋白（Ki67）elisa试剂盒操作步骤： 
1. 准备试剂：ELISA 试剂盒中包含以下组分：已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）、酶标记的抗原或抗体（结合物）、酶的底物、阴性对照品和阳性对照品（定性测定中）、参考标准品和控制血清（定量测定中）、结合物及标本的稀释液、洗涤液和酶反应终止液。
2. 包被：用包被缓冲液将抗原或抗体稀释至适当浓度，然后在每个聚苯板的反应孔中加入 0.1ml，4℃过夜。
3. 洗涤：弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液清洗反应孔，重复 3 次，每次 3 分钟。
4. 加样：将待检样品和阴性对照品、阳性对照品按一定稀释度加入已包被的反应孔中，37℃孵育 1 小时。
5. 洗涤：再次清洗反应孔。人24α羟化酶elisa试剂盒
6. 加酶标记物：将酶标记的抗原或抗体加入反应孔中，37℃孵育 1 小时。
7. 洗涤：清洗反应孔。
8. 加底物：每个反应孔中加入适量的酶底物，37℃孵育 10-30 分钟。
9. 终止反应：加入终止液，终止酶促反应。
10. 读数：用酶标仪检测各反应孔的吸光度值，根据标准曲线计算待测样品的浓度。
 通过上述步骤，可以实现对特定抗原或抗体的高灵敏度检测。 

大鼠Ki-67蛋白（Ki67）elisa试剂盒操作注意事项：
1）试剂应按标签说明书储存，使用恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 

大鼠Ki-67蛋白（Ki67）elisa试剂盒性能
1. 灵敏度：的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

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