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黑色素脂褐素染色液(Schmorl法)
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黑色素脂褐素染色液(Schmorl法)
产品货号:M20137
产品规格:2×50ml
产品简介:
脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素,由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成,被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的。脂褐素氧化过程是缓慢的、逐步发生的,因此色素会呈现出不同的染色反应、不同的颜色,形状和大小也变化不一。脂褐素可见于肝脏、肾脏、心肌、肾上腺、神经细胞与神经节细胞等,多分布在细胞核周围。
脂褐素又可分为早期脂褐素和晚期脂褐素。早期脂褐素有脂质的所有特征,用苏丹黑B法可染成灰黑色。晚期脂褐素是经完全氧化后的色素,失去了嗜苏丹性,但有更大的还原力,主要用Schmorl高铁-铁还原法来显示。目前常用的脂褐素染色法有PAS法、Schmorl高铁-铁还原法、Gomori醛复红法等。黑色素属于非血源性内生色素,是一组颜色从浅棕色到黑色的色素。这种色素通常出现在皮肤、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。黑色素是一种十分稳定的物质,既不溶于有机溶剂,也不溶于水;可摄取亚铁离子形成黑色素亚铁复合物,再与铁作用成蓝色;可把氨银溶液还原为金属银;可被等强氧化剂漂白。许多方法可用于识别黑色素和黑色素生成细胞,其中最可靠的有:还原方法,如Masson-Fontana银技术和Schmorl高铁-铁还原法;酶方法(如多巴反应);荧光方法;免疫组织化学。
黑色素脂褐素染色液(Schmorl法)的染色原理是黑色素和脂褐素均有强大的还原性,可将高铁离子还原为亚铁离子,再与铁反应而呈暗蓝色。本法可显示任何能还原高铁化物的物质,因此对黑色素和脂褐素的显示不是特异性的。可根据组织和细胞的不同,色素的位置和分布情况以及着色深浅,对鉴别可有一定的帮助。亦可与氨银法、醛品红法、高碘酸无色品红法等进行比较观察。 本产品仅用于科研领域,不用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
产品名称 | 2×50ml | 保存条件 | |
试剂(A): Schmorl stain | A1:高铁盐溶液 | 45ml | 室温 |
A2:铁溶液 | 5ml | 2-8℃,避光 | |
临用前,取A1、A2按9:1混合即成,不宜提前配制。 | |||
试剂(B):核复染液 | 50ml | 室温 | |
自备材料:
1.固定液:10%中性福尔马林、10%福尔马林等
2.系列乙醇
3.1%乙酸水溶液
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色:
1.组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。
2.切片厚度4μm,常规脱蜡至水。
3.蒸馏水水洗1min。
4.切片入Schmorl stain (见注意事项3),浸染1~5min。
5.自来水冲洗2min。
6.(可选)入1%乙酸水溶液中浸洗1~3min,充分去除铁残留。自来水冲洗2min。
7.入核复染液染色3~10min。
8.自来水冲洗1~2min。
9.常规脱水透明,中性树胶封固。
(二)冰冻切片染色:
1.无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3min。
2.染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。
(三)细胞染色:
1.4%多聚甲醛固定10~20min。
2.自来水冲洗2次,每次2min。
3.蒸馏水冲洗2次,每次2min。
4.染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,但操作时间应相应延长。
染色结果:
脂褐素、黑色素、 绿蓝色至暗蓝色
细胞核、其他组织 红色
注意事项:
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.整个操作过程中尽量使用蒸馏水或去离子水,避免水中还原性杂质影响染色。
3.Schmorl stain应现用现配,一般2小时内有效。切片在Schmorl stain中的染色时间不宜太长,一般情况下黑色素比脂褐素先着色,2min内应有反应。如染色时间太长,背景将着染很深影响对比观察。
4.1%乙酸水溶液为备选方法,可选做,乙酸浸洗可有助于去除铁残留。
5.冰冻切片和细胞染色,根据具体情况摸索实验条件。
6.本法可显示任何能还原高铁化物的物质,因此对脂褐素的显示不是特异性的。可根据组织和细胞的不同,色素的位置和分布情况以及着色深浅,对鉴别脂褐素有一定帮助。可与氨银法、醛品红法、高碘酸无色品红法等进行比较观察。
7.一般组织都有一定的还原性,易使背景着色,因此,染色时应控制在短而恰当的时间内,达到脂褐素清晰而背景浅淡为佳。
有效期:4℃,避光保存,12个月有效。
原创作者:上海尚宝生物科技有限公司



