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流式胞内染色步骤
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(使用FIX & PERM固定破膜)

制备好细胞悬液,取100ul
(全血样本:人100ul,小鼠30~50ul)
染表面抗体,室温避光孵育15min,不用洗涤
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加入FIX&PERM Reagent A 100ul室温孵育15min
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加入3ml流式染色缓冲液(Flow Cytometry Staining Buffer)
300g 离心5min 弃上清收集细胞
液体尽量倒干净,不要残留
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涡旋混匀沉淀,加入FIX&PERM Reagent B
100ul和胞内抗体
(同型对照管加入同等剂量的抗体)
混匀,室温避光孵育20min
↓
加入3ml流式染色缓冲液,300g离心5min弃上清收集细胞
↓
用0.5ml 流式染色缓冲液重悬后立即上机。
或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小时内上机分析
Anti-VDAC/FITC 荧光素标记电压依赖性阴离子通道抗体IgG
Anti-CD14/Biotin 生物素化CD14抗体IgG
Anti-VEGF/FITC 荧光素标记VEGF抗体IgG
Anti-VEGF(Rabbit)/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子抗体IgG
Anti-VEGF-A/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子A抗体IgG
Anti-VEGF-B/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子B抗体IgG
原创作者:上海瑞齐生物科技有限公司


