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人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒
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一、人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒实验原理
11月9日消息,据上海臻科报道:人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人二氢叶酸还原酶(DHFR)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人二氢叶酸还原酶(DHFR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
二、人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒产品优势
1、优点明显 众所周知产品具有灵敏度高、特异性强的特点决定的产品好坏,我司产品具有稳定的重复性,吸附性能好,空白值低,并适用于血清血浆 组织匀浆等多种样本类型的检测,方法简单,操作方便,限度的节省了实验经费。
2、品质保障 产品保证质量,出库质检把控严格,保障提供给客户的100%是优质产品,运输全程跟踪,公司承诺有任何质量问题包退换,诚信经营,合作共赢。我们提供实验室试剂、耗材一站式供应服务,超低价,高品质,进口品牌全线代理,优势的渠道,我们只做行货,不用担心质量问题。售后技术支持到底!
3、专业定制 应市场需求公司特推出专业定制酶联免疫分析试剂盒服务,全程有专业的技术老师跟踪并和客户保持沟通,直到定制成功为止。
4、免费代测 公司承诺订购酶联免疫分析试剂盒,享全程技术指导并可免费代测,为您分忧。全程有专业技术老师负责代测,收到样本一般7个工作日出结果。
5、服务周到 设立售后服务中心,24小时及时响应,真正做到后顾无忧,不断完善服务体系。
三、人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒标本要求
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
四、人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒操作流程
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
五、人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒注意事项
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,使用排枪加样。
3.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
六、订购流程
七、人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒标准曲线绘制
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
八、特别说明
上海臻科长期专业供应各类科研产品,包括ELISA试剂盒、生物试剂、标准品对照品、培养基、检测卡、染色液染色试剂盒等优质产品。公司本着客户至上的原则为客户提供高质量高品质的产品,公司承诺如有任何质量的问题请打电话与我们工作人员联系,免费包退换(非人为因素造成的)会给您一个满意的答复。欢迎来电咨询"人二氢叶酸还原酶(DHFR)ELISA检测试剂盒"*新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书!以上是上海臻科生物科技有限公司的产品介绍,如需了解更多可联系我司客服人员。
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