免疫组化中抗原修复的方法

免疫组化中，组织在福尔马林或者其他固定液的固定过程中，经常会出现蛋白质交联而引起的抗原决定簇封闭，极大的降低抗原的检出率和假阴性现象。此外，临床病理诊断中，免疫组化的应用广泛，因此抗原修复成为了免疫组化极其重要的一环。不同的抗原，采取不同的适宜的抗原修复方法，才能获得的清晰、有效的结果。一般情况下，抗原修复的方法主要有三大类：高温高压修复法、微波加热修复法、酶消化法。那我们又该以何种方法来选择呢？

提示：
抗原修复的强度排序：高温高压修复法（准确度高，条件稳定适合大规模处理，易脱片）> 微波加热修复法（反应强度适中，微波加热不均匀不适宜大规模处理）> 酶消化法；
抗原修复方法应用广度：微波加热修复法（实验室常用）>高温高压修复法（医院常用）> 酶消化法（针对一些特殊组织和靶点效果独特，应用不太广泛）;

修复液的效果对比：EDTA（pH=8.0 或 9.0）缓冲液 > 柠檬酸盐缓冲液（pH=6.0）

绝大多数细胞质抗原不做任何修复，一般也能获得相对稳定的染色结果。但采取一些抗原修复方法，可以是抗原决定簇释放的更加充分，进一步提高结果的可靠性和敏感性。所以我们一般采取的是强度适中，反应相对温和的抗原修复方法。推荐使用微波修复法（加热的时间和温度都可以有所调整，可以根据经验或者查阅文献获得）

推荐的方法：微波加热修复法

推荐的修复液：常用柠檬酸盐缓冲液（pH=6.0）

实验过程：微波高温加热 2 min（见微小波动，温度在 90～95 ℃）后，立即转为保温 8 min 待缓慢降至室温，用蒸馏水冲洗 2 次，加入 3% H2O2 8 ~10 min，在用蒸馏水冲洗 2 次，放入 PBS 中并进入下一步骤。（提示：在实际的修复试验中，我们还要控制好修复时间，时间过长容易导致过修复、组织破坏和非特异性反应增强等不利影响）

Formoterol Fumarate 100mg 富马酸福莫特罗标准品 183814-30-4
Forskolin 40mg 佛司可林标准品 66575-29-9
Foscarnet Related Compound D 0.27ml 膦甲酸相关物质D标准品 1474-78-8
Foscarnet Sodium 50mg 膦甲酸钠标准品 34156-56-4
Fosinopril Sodium 200mg 福辛普利钠标准品 88889-14-9
Fosphenytoin Sodium 250mg 磷苯妥英钠标准品 92134-98-0
Fructose 125mg D-(-)-果糖标准品 57-48-7
Fulvestrant 150mg 氟维司群标准品 129453-61-8
Fumaric Acid 200mg 富马酸标准品 110-17-8
Furazolidone 200mg 呋喃唑酮标准品 67-45-8

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