传代方法①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

生长条件30℃；24-48h；好氧；

存储条件2~8℃

安全等1

形态大小：一般颜色：灰白色形状：圆形边缘：整齐干湿：湿润光滑：光滑透明度：不透明隆起度：隆起

模式菌株no

保藏方法：

1传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2. 液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3. 载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4. 寄主保藏法

用于目尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5. 冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷冻干燥保藏法

先使微生物在低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。

菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一种）、原种（二种）和栽培种（三种）三。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

1mg 生物素化的碱性磷酸酶（AP） Biotin-AP -20℃保存

100mL Denhardt溶液，50×（非同位素用） Denhardt Solution, 50× -20℃保存

10mg Denatured Salmon Testes DNA Solution Denatured Salmon Testes DNA Solution 常温保存

1瓶 HCCC-9810细胞株 HCCC-9810 低温运输和保存

2 ug pTRE-Tight-BI pTRE-Tight-BI 低温运输，-20℃保存

500U β-琼脂糖酶Ⅰ

1瓶 BIU-87/Adr细胞株 BIU-87/Adr 低温运输和保存

1mL 单细胞悬浮液 Single Cell Suspension Solution 4℃保存

2 ug pEXP-Lib pEXP-Lib 低温运输，-20℃保存

2 ug TOPFlash TOPFlash 低温运输，-20℃保存

2 ug pLKO.1 - TRC cloning vector pLKO.1 - TRC cloning vector 低温运输，-20℃保存

50T 小反刍兽疫病毒PCR检测试剂盒低温运输，-20℃保存

5g 胆酸钠 Sodium Cholate 常温保存D（+）-氨基葡萄糖盐酸盐 66-84-2 20mg 订购|咨询

硫酸锌 7446-20-0 20mg 订购|咨询

维生素B1 59-43-8 20mg 订购|咨询

维生素B6 65-23-6 20mg 订购|咨询

胡萝卜坚固杆菌烟碱 20033 20mg 订购|咨询

维生素A乙酸酯 127-47-9 20mg 订购|咨询

维生素D3 511-28-4 20mg 订购|咨询

维生素B2 83-88-5 20mg 订购|咨询

L-色氨酸 73-22-3 20mg 订购|咨询

甘露醇 87-78-5 20mg 订购|咨询

富马酸 110-17-8 20mg 订购|咨询

泛酸钙 137-08-6 20mg 订购|咨询

腺嘌呤 73-24-5 20mg 订购|咨询

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