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elisa试剂盒固体样本处理原则

点击次数：230 发布时间：2017/6/22 15:19:26

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刘**

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elisa试剂盒固体样本处理原则：称取1g的固体样本，用9g的合适缓冲液溶解，分泌蛋白可以直接离心取上清检测，细胞内的蛋白，要先收集细胞，再用合适方法破碎，离心取上清测试。

植物标本的采集及保存：

(1) 称取0.1g（误差±3%以内）新鲜植物组织样本，在液氮中充分研磨；

(2)加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度过一夜；

(3) 于4度，8000rpm，离心1小时，取上清；

(4) 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干，保存备用；

(5)上样前加入pH7.4 PBS缓冲液（1ml定容）。混匀后室温放置30分钟，然后4度离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4度待用。

elisa试剂盒固体样本收集注意事项：

1、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2、标本采集后尽快进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、我们罗列的是通用的样本处理方法，无法涵盖各种样本，对于一些特殊样本，建议实验人员多参考已发表的文献，自行设计合理的样本处理方法。

原创作者：上海谷研实业有限公司