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讲解SCFv ElISA可溶性的方法与步骤
点击次数：254 发布时间：2016/12/1 14:31:30
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黄*
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SCFv ElISA可溶性的方法步骤
1．按每孔100pl蛋白抗原包被微量滴定板，4℃过夜。PBS中10ug／m1的浓度是包被抗原的标准浓度。但有时需要更高的浓度或者不同的包被缓冲液（比如碳酸盐缓冲液）。
2．弃去抗原液并用PBS洗涤板孔2次。
3．加入200gl的2％MPBS封闭每个板孔，37℃孵育2小时。
4．用PBS洗涤板孔3次。
5．每孔加入50ul的4％MPBS。
6．每孔加入50ul含可溶性抗体的培养基上清，用移液器反复吹吸混匀，室温孵育1小时。
7．弃去溶液，用PBS／Tween洗涤板孔3次，再用PBS洗涤3次。
8．每孔加入100ul 9E10单抗（用2％MPBS按1：1000稀释）。室温孵育孔板l小时。
9．弃去溶液，用PBS／Tween洗涤板孔3次，再用PBS洗涤3次。
10．每孔加入抗小鼠HRP（用2％MPBS按1：2000稀释）。室温孵育孔板1小时。
11．弃去二抗，并用PBS／Tween和PBS分别洗涤3次。
12．每孔加入100ul TMB系统溶液，并在暗处室温孵育10～30分钟。数分钟内，应呈现蓝色。
13．每孔加入50～100ul终止液，终止反应。
14．在450nm处读板。
1．按每孔100pl蛋白抗原包被微量滴定板，4℃过夜。PBS中10ug／m1的浓度是包被抗原的标准浓度。但有时需要更高的浓度或者不同的包被缓冲液（比如碳酸盐缓冲液）。
2．弃去抗原液并用PBS洗涤板孔2次。
3．加入200gl的2％MPBS封闭每个板孔，37℃孵育2小时。
4．用PBS洗涤板孔3次。
5．每孔加入50ul的4％MPBS。
6．每孔加入50ul含可溶性抗体的培养基上清，用移液器反复吹吸混匀，室温孵育1小时。
7．弃去溶液，用PBS／Tween洗涤板孔3次，再用PBS洗涤3次。
8．每孔加入100ul 9E10单抗（用2％MPBS按1：1000稀释）。室温孵育孔板l小时。
9．弃去溶液，用PBS／Tween洗涤板孔3次，再用PBS洗涤3次。
10．每孔加入抗小鼠HRP（用2％MPBS按1：2000稀释）。室温孵育孔板1小时。
11．弃去二抗，并用PBS／Tween和PBS分别洗涤3次。
12．每孔加入100ul TMB系统溶液，并在暗处室温孵育10～30分钟。数分钟内，应呈现蓝色。
13．每孔加入50～100ul终止液，终止反应。
14．在450nm处读板。
人癌胚铁蛋白(CEF) elisa试剂盒进口/分装英文名称：Human Carcinoembryonic Ferritin,CEF ELISA Kit规格:96T/48T
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人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA Kit 规格:96T/48T
人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：Human breast cancer susceptibility protein 2,BRCA-2 ELISA Kit规格:96T/48T
人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 ELISA Kit规格:96T/48T
人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 特价促销英文名称：Human Bcl-2 associated X protein, Bax ELISA Kit规格:96T/48T
人H-ras ELISA试剂盒特价供应英文名称：Human H-ras ELISA Kit规格:96T/48T
人c-sis ELISA试剂盒进口/分装英文名称：Human c-sis ELISA Kit规格:96T/48T
人c-jun ELISA试剂盒进口/原装英文名称：Human c-jun ELISA Kit规格:96T/48T
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人Smad7 ELISA试剂盒 进口/原装英文名称：Human Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISA Kit规格:96T/48T
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人细胞角蛋白19(CK-19)ELISA试剂盒 特价促销英文名称：Human cytokeratin 19,CK-19 ELISA Kit规格:96T/48T
人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒 特价供应英文名称：Human Chromogranin,CgA ELISA Kit规格:96T/48T
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人生长调节致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒 进口/原装英文名称：Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity,GROα/MGSA ELISA Kit规格:96T/48T
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人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit规格:96T/48T
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人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：Human cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA Kit规格:96T/48T
人肝癌抗原(PHC)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：Human primary hepatic carcinoma,PHC ELISA Kit规格:96T/48T
人鼻咽癌(NPC)ELISA试剂盒特价促销英文名称：Human nasopharyngeal carcinoma,NPC ELISA Kit规格:96T/48T
人膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Human urinary bladder cancer antigen,UBC ELISA Kit规格:96T/48T
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