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在ELISA实验中如何应对洗涤步骤呢?

点击次数:471 发布时间:2018/1/31 9:59:08
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恒远公司专业技术员强调:洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELISA靠洗涤来达到分离游的和结合的酶标记物的目的,可以见得洗涤步骤的重要性。那么在ELISA实验中如何应对洗涤步骤呢?

第一、ELISA洗涤方式

[浸泡式]
1.吸干或甩干孔内反应液;
2.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
3.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡
时间不可随意缩短;
4.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可
甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
5.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本
底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。

[流水冲洗式]
最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水
。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。

第二、ELISA洗涤液的使用原则
1.某一项目的洗液建议使用该试剂盒内的洗液;
2.同一elisa试剂盒洗液用完了,建议采用同一批号的洗液;
3.同一批号的洗液也用完了,建议采用同一项目的试剂洗液;
4.同一项目的洗液用完了,建议使用该项目其他厂家的洗液;
5.同一项目所有厂家都用完了,建议采用同一系列项目的洗液
;
6.不建议国产洗液与进口洗液混用,也更不建议不同系列项目
的洗液混用,这两点都是因为洗液的配置成分不同,特别是不同项目的洗液,主要组分都不太一样。 虽然对强阳性标本影响不是很大,但对于临界阳性阴性(灰区)标本影响较大,所以不提倡不同系列项目洗液混用。

在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术,应引起操作者的高度重视
,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎,各位亲们要注意哦!恒远ELISA试剂盒提供全程技术指导服务及免费代检测服务。

原创作者:恒远免疫学第三方检测中心

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